请问用PCR克隆已知基因的步骤中为何要将回收的目的基因重组在大肠杆菌质粒上去呢?谢谢啦
创始人
2025-06-16 04:33:57
请问用PCR克隆已知基因的步骤中为何要将回收的目的基因重组在大肠杆菌质粒上去呢?谢谢啦
1、保存(将目的基因重组到大肠杆菌里面,保存大肠杆菌,当以后再用时活化大肠杆菌,然后在提取目的基因就可以了)
2、将目的基因重组到大肠杆菌中表达
3、可以构建基因文库
如果基因组整合在质粒上,质粒随着大肠杆菌的繁殖可以进行自我复制,相应的目的基因也就大量的复制。
如果目的基因要整合到大肠杆菌自身的基因组上,会影响大肠杆菌自身正常的生理代谢,就不能起到大量扩增目的基因的目的。
1、这是作为保藏的手段,不然你怎么保存你的基因?
2、这是获得自引物之间完整序列的必要途径,因为测序是无法获得待测序列起始部分和约800-1000bps之后的序列,因此需要连接到质粒上测序,俗称TA克隆。为什么会这样我就不说了,懒得打字。
为了基因的进一步扩增和保存。
大肠杆菌代谢快,生长的也快,很快时间就会生长一代,我们所克隆的基因就会随着大肠杆菌的生长而复制,仅仅一个晚上,我们的所需要的目的基因就有很多很多,提个质粒我们就可以轻松的得到它们了。

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